| 產品名稱 |
人宮頸癌組織源性原代細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4280 |
| 組織來源 |
中國成年病人手術后的宮頸癌組織。 |
| 規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞描述 |
鱗狀上皮細胞癌，約占90％～95％。 腺癌僅占5％～10％ |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分型 |
1、目觀在發展為浸潤癌前，肉眼觀察無特殊異常，或類似一般宮頸糜爛。隨著浸潤癌的 出現，宮頸可表現以下四種類型： （1）糜爛型：環繞宮頸外口表面有粗糙的顆粒狀糜爛區，或有不規則的潰破面、觸及易出 血。 （2）外生型：又稱增生型或菜花型。由息肉樣或乳頭狀隆起，繼而發展向陰道內突出的大 小不等的菜花狀贅生物，質脆易出血。 （3）內生型：又稱浸潤型。癌組織宮頸深部組織浸潤、宮頸肥大而硬，但表面仍光滑或僅 有淺表潰瘍。 （4）潰瘍型：不論外生型或內生型進一步發展后，癌組織壞死脫落，形成潰瘍，甚至整個 子宮頸為一大空洞所替代，因常有繼發性感染，故有惡臭的分泌物排出。子宮頸癌尤其是腺 癌也可向頸管內生長，使子宮頸成桶狀增大，這也是內生型的一種。 2、鏡查 （1）不典型增生：不典型增生表現為底層細胞增生，底層細胞不但增生，而且有細胞排列 紊亂及細胞核增大、濃染、染色質分布不均等核異質改變。 ①輕度不典型增生(間變I 級)：上皮細胞排列稍紊亂，細胞輕度異型性，異型上皮占據上皮 層的下三分之一。②中度不典型增生(間變Ⅱ級)：上皮細胞排列紊亂，異型性明顯，異型上皮占據上皮層的下 三分之二。 ③重度非典型增生(間變Ⅲ級)：幾乎全部上皮極性紊亂或極性消失，細胞顯著異型性和原位 癌已不易區別。 （2）原位癌：又稱上皮內癌。上皮全層極性消失，細胞顯著異型，核大，深染，染色質分 布不均，有核分裂相。但病變仍限于上皮層內，未穿透基底膜，無間質浸潤。異型細胞還可 沿著宮頸腺腔開口進入移行帶區的宮頸腺體，致使腺體原有的柱狀細胞為多層異型鱗狀細胞 所替代，但腺體基底膜仍保持完整，這種情況稱為宮頸原位癌累及腺體。 （3）鏡下早期浸潤癌：鏡下早期浸潤癌在原位癌基礎上，偶然可發現有癌細胞小團已穿破 基底膜，似淚滴狀侵入基底膜附近的間質中，浸潤的深度不超過5mm，寬不超過7mm，也 無癌灶互相融合現象，也無侵犯間質內脈管跡象時，臨床上無特征。 （4）鱗狀上皮浸潤癌：當癌細胞穿透上皮基底膜，侵犯間質深度超過5mm，稱為鱗狀上皮 浸潤癌。在間質內可出現樹枝狀、條索狀，彌漫狀或團塊狀癌巢。 ①I 級：分化好。癌巢中有相當數量的角化現象，可見明顯的癌珠。 ②Ⅱ級：中等分化(達宮頸中層細胞的分化程度)，癌巢中無明顯角化現象。 ③Ⅲ級：未分化的小細胞(相當于宮頸底層的未分化細胞)。 （5）腺癌：腺癌來源于被覆宮頸管表面和頸管內腺體的柱狀上皮。鏡檢時，可見到腺體結 構，甚至腺腔內有乳頭狀突起。腺上皮增生為多層，細胞低矮，異型性明顯，可見核分裂相。 如癌細胞充滿腺腔，以致找不到原有腺體結構時，往往很難將腺癌與分化不良的鱗癌區別。 如腺癌與鱗癌并存時稱為宮頸腺、鱗癌。腺、鱗癌惡性程度高，轉移早、預后差。 |
